基因检测 | “PCR”基因检测的核心技术

1988PCR技术的优化Saiki等在黄石公园温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus, Taq) 中提取到一种耐高温DNA聚合酶[5]。该酶耐高温的性质使其热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶,从而极大地提高了PCR扩增的效率。Taq酶的发现，使得PCR真正变为现实，为其自动化铺平了道路。

1989PCR爆炸年美国《Science》杂志列PCR为十余项重大科学发明之首，将热稳定DNA聚合酶命名为“年度分子”。

1993诺贝尔奖凯利•穆利斯(Kary Banks Mullis)博士因PCR技术荣获诺贝尔化学奖。

PCR技术原理

一个PCR循环包括变性-退火-延伸：

首先高温加热变性解链DNA模板；随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火；再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。

不断重复此循环，短短数十分钟就可把目标DNA进行2n指数倍扩增。

PCR反应示意图

PCR技术应用

PCR以其高灵敏度、高效率扩增目标DNA的特点，广泛应用于生命科学、医疗诊断、法医检测、食品卫生和环境检测等方面。

参考文献

[1] Watson, J. D. and F. H. Crick (1953). "Molecular structure of nucleic acids; a structure for deoxyribose nucleic acid." Nature 171(4356): 737-738.

[2] Khorana, H. G. (1971). "Total synthesis of the gene for an alanine transfer ribonucleic acid from yeast." Pure Appl Chem 25(1): 91-118.

[3] Kleppe, K., et al. (1971). “Study on polynucleotides: repair replication of short synthetic DNA’s as catalyzed by DNA polymerases.” J Mol Biol 56(2): 341-361.

[4] Saiki, R. K., et al. (1985). "Enzymatic amplification of beta-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia." Science 230(4732): 1350-1354.

[5] Saiki, R. K., et al. (1988). "Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase." Science 239(4839): 487-491.

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图文来源：基因谷，版权归原作者所有。返回搜狐，查看更多